S1P1真核表达载体的构建及在HEK293细胞膜上的表达

来源 :川北医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：asa333

【摘要】

：

目的构建含人Ⅰ型1-磷酸鞘氨醇受体（SIPI）-全长cDNA序列及HA和／或EGFP标签的真核表达载体，并观察其在HEK293细胞上的表达。方法合成2条HA寡核苷酸，克隆入s1P1-Myc-EGFP-N1载体。以

【作者】

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胡为民杨健唐恩洁敬保迁任碧轩

【机构】

：

川北医学院基础医学院微生物与免疫学教研室,川北医学院免疫学与分子生物学研究所

【出处】

：

川北医学院学报

【发表日期】

：

2008年1期

【关键词】

：

S1P1 真核表达载体 HEK293细胞 Sphingosine 1-phosphate receptor type 1 （S1P1） Eukaryotic

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目的构建含人Ⅰ型1-磷酸鞘氨醇受体（SIPI）-全长cDNA序列及HA和／或EGFP标签的真核表达载体，并观察其在HEK293细胞上的表达。方法合成2条HA寡核苷酸，克隆入s1P1-Myc-EGFP-N1载体。以HA-S1P1-Myc-EGFP-N1为模板，用PCR的方法扩增HA-S1P1并克隆入pcDNA3．1（曲载体。限制性酶切消化、PCR、测序的方法鉴定，载体经Polyfect转染入HEK293细胞。G418筛选出稳定细胞株。用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测S1P1在HEK293细胞上的表达。结果

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