【摘 要】
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目的 探讨FHL2基因对人类急性红白血病细胞生物学功能的影响.方法 应用Western blot检测常见白血病细胞系(K562、HEK293T、U937、HL-60、Kasumi-1、SKNO-1、NB-4及Nalm-6)FHL2蛋白表达情况.采用RNA干扰技术设计并合成FHL2 mRNA特异性shRNA,构建pLKO.1-puro干扰载体,制备慢病毒并感染人类急性红白血病K562细胞;应用实时定
【机 构】
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300020天津,中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室,300020天津,中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室,300020
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目的 探讨FHL2基因对人类急性红白血病细胞生物学功能的影响.方法 应用Western blot检测常见白血病细胞系(K562、HEK293T、U937、HL-60、Kasumi-1、SKNO-1、NB-4及Nalm-6)FHL2蛋白表达情况.采用RNA干扰技术设计并合成FHL2 mRNA特异性shRNA,构建pLKO.1-puro干扰载体,制备慢病毒并感染人类急性红白血病K562细胞;应用实时定量聚合酶链反应(PCR)方法检测干扰效率;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测干扰FHL2对细胞增殖能力的影响;用流式细胞术分析细胞凋亡的变化.结果 FHL2在K562、Kasumi-1和Nalm-6等白血病细胞系中表达,尤其在K562细胞中高表达.Western blot检测显示干扰FHL2的K562细胞FHL2蛋白相对表达水平较转染阴性对照序列的K562细胞明显下降(相对表达水平分别为1、0.284,t=8.872,P=0.0004),干扰K562细胞中FHL2基因表达能够抑制细胞的增殖,促进细胞的凋亡.结论 FHL2基因在多种白血病细胞系中表达升高.shRNA靶向干扰FHL2基因的表达可有效抑制K562细胞的增殖,促进其凋亡。
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