【摘 要】
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目的:建立双抗体夹心法ELISA检测HEV抗原,用于定量检测戊型肝炎p179疫苗生产过程中初制品、半成品和疫苗成品。方法:将单克隆抗体3G1、5G5、1G10、3A10和4E9分别进行辣根过氧
【机 构】
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东南大学医学院,长春生物制品研究所有限责任公司
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目的:建立双抗体夹心法ELISA检测HEV抗原,用于定量检测戊型肝炎p179疫苗生产过程中初制品、半成品和疫苗成品。方法:将单克隆抗体3G1、5G5、1G10、3A10和4E9分别进行辣根过氧化物酶标记,通过竞争ELISA检测确定最佳抗体配对用于建立双抗体夹心法ELISA,对p179生产过程中所得制品进行抗原定量检测。结果:5种单克隆抗体可以分成两组,分别针对p179疫苗抗原上的两种不同抗原表位,选择3G1为包被抗体、4E9为酶标抗体建立的双抗体夹心法ELISA具有良好的敏感性和特异性,对p179抗原检测的最低浓度可至15.6 ng·ml-1。该方法能够有效检测p179疫苗生产过程中的初制品、半成品和疫苗成品的抗原含量,反映抗原纯化各步骤的得率。结论:建立的双抗体夹心法ELISA可作为p179疫苗生产过程中的抗原检测方法,这有助于定量检测p179疫苗生产过程中的抗原成分。
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