抗HIV-1gp120单链抗体和白喉毒素融合基因的构建及其在大肠杆菌中的表达

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目的构建人源抗HIV-1单链抗体和白喉毒素融合基因的原核表达质粒,并诱导其在大肠杆菌中表达重组蛋白。方法通过PCR扩增,获得目前应用较多的DAB389基因片段,将其克隆人原核表达载体pET-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3),WIG诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot方法分析鉴定。结果酶切及DNA序列测定鉴定正确。SDS-PAGE和West.erR Blot分析证实,重组质粒可表达出相对分子质量为75200的蛋白,与DT-hsl20融合基因分子量一致,其表达量约占菌体总蛋白的21%,
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