【摘 要】
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目的:制备抗HIV-1p24单克隆抗体(mAb)及特性鉴定.方法:采用细胞融合技术制备可稳定分泌抗HIV-1 p24 mAb的杂交瘤细胞.选择高效价、识别不同抗原表位的mAb纯化后,分别包被ELIS
【机 构】
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河北医科大学生物医学工程中心,河北医科大学基础所免疫室
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目的:制备抗HIV-1p24单克隆抗体(mAb)及特性鉴定.方法:采用细胞融合技术制备可稳定分泌抗HIV-1 p24 mAb的杂交瘤细胞.选择高效价、识别不同抗原表位的mAb纯化后,分别包被ELISA板及作为酶标记mAb,建立双mAb夹心ELISA法,检测400份正常人血浆,20份抗HIV抗体阳性(p24抗原阴性)的血浆,20份HIV-1感染的细胞培养上清及HIV-1 p24抗原国家参考品,并同时用进口p24抗原检测试剂盒进行对比检测.结果:经细胞融合、筛选、克隆化,共获得10株可分泌高效价mAb的杂交瘤细胞.纯化的腹水mAb经配对试验,选A值≥2.50的2株mAb建立的双mAb夹心ELISA法,敏感性可达2.5 ng/L,且与进口试剂盒检测结果的一致性良好.结论:建立了具有高度敏感性和特异性的双mAb夹心ELISA法,为研制可用于检测HIV-1 p24抗原的试剂盒奠定了基础.
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