【摘 要】
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目的：探讨小鼠牙囊细胞的体外培养方法并观察其形态特征。方法：体视显微镜下分离出生后3～5天仔鼠牙胚,用Ⅰ型胶原酶消化后分离牙囊组织,采用酶消化-组织块法和二次酶消化法进行牙囊细胞的原代及传代培养,倒置相差显微镜下进行细胞形态学的观察。结果：酶消化-组织块法经4～5天,部分组织块周围见细胞呈放射状爬出,继续培养观察,2周后细胞集落仍难以融合,无法传代。二次酶消化法第二天可见散在细胞集落形成,4～5天
【机 构】
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南方医科大学南方医院,南方医科大学口腔医学院 第四军医大学口腔医院口腔生物学教研室,军事口腔医学国
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目的：探讨小鼠牙囊细胞的体外培养方法并观察其形态特征。方法：体视显微镜下分离出生后3～5天仔鼠牙胚,用Ⅰ型胶原酶消化后分离牙囊组织,采用酶消化-组织块法和二次酶消化法进行牙囊细胞的原代及传代培养,倒置相差显微镜下进行细胞形态学的观察。结果：酶消化-组织块法经4～5天,部分组织块周围见细胞呈放射状爬出,继续培养观察,2周后细胞集落仍难以融合,无法传代。二次酶消化法第二天可见散在细胞集落形成,4～5天细胞接触融合。采用二次酶消化法可获得约85％的成功率。镜下观察发现,两种方法原代培养均可见多角形及梭形细胞两种细胞群体,传代培养多角形细胞消失,第二代后多梭形细胞占大多数。传代发现,第三代细胞生长速度最快,第四代细胞增殖速度明显减慢,第五代后细胞趋于静止；同时细胞随着传代次数的增加胞体逐渐增大,细胞多形性趋于明显,可出现一些树突形细胞。结论：采用二次酶消化法进行小鼠牙囊细胞原代培养可在短时间内获得较多的细胞,操作简便且成功率高,是一种较理想的小鼠牙囊细胞培养方法。此外,我们归纳了小鼠及大鼠体外培养牙囊细胞的四种形态特征和六种培养方法,总结了其共性和个性,期望为牙囊细胞的体外培养提供一个更为规范的实验依据,便于研究结果的互相比较。
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