【摘 要】
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取18日龄的SPF鸡胚,分别采用组织块培养法、胰蛋白酶、胶原酶I和嗜热菌蛋白酶消化法分离和体外培养小肠上皮细胞。结果表明：组织块培养法所获得的上皮细胞纯度较低;胰蛋白酶消
【机 构】
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江西农业大学／江西省高等学校动物营养与饲料重点实验室,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(30800791);江西省青年科学家培养对象计划项目(赣科发计字[2010]209号)
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取18日龄的SPF鸡胚,分别采用组织块培养法、胰蛋白酶、胶原酶I和嗜热菌蛋白酶消化法分离和体外培养小肠上皮细胞。结果表明：组织块培养法所获得的上皮细胞纯度较低;胰蛋白酶消化后多为单细胞,细胞贴壁和生长能力较弱;胶原酶Ⅰ单独消化50 min或嗜热菌蛋白酶单独消化110 min以及胶原酶Ⅰ、嗜热菌蛋白酶联合消化后均可得到大量隐窝细胞团块,经低速离心去除单细胞、差速贴壁除去成纤维细胞,可获得较纯的上皮细胞。分离的细胞接种培养12～24 h贴壁,48～72 h细胞团中的细胞向四周蔓延,形成一群群的细胞集落,6～7
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