造血干细胞Hdac3基因促进鼠淋巴细胞分化

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目的 通过建立造血干细胞特异性Hdac3条件性敲除小鼠模型,探讨Hdac3基因对小鼠造血发育的影响。方法 Hdac3fl/fl小鼠与Mx1-Cre小鼠杂交获得Hdac3fl/flMx1-Cre小鼠,PCR鉴定小鼠基因表型。连续注射poly(I:C),诱导Cre表达,得到造血干细胞Hdac3敲除鼠Hdac3fl/flMx1-Cre+(CKO)及对照组小鼠Hdac3+/+Mx1-Cre+(WT),Q-PCR分析Hdac3 mRNA表达水平。流式细胞术检测小鼠外周血淋巴细胞数量及比例。HE染色观察小鼠胸腺、脾脏形态学改变。流式细胞术检测小鼠外周血CD3+、B220+细胞比例。克隆形成实验分析小鼠造血干/祖(LSK)细胞的分化能力。结果 成功建立造血干细胞Hdac3fl/flMx1-Cre+(CKO)小鼠模型。与对照组相比,CKO小鼠外周血淋巴细胞绝对数量(P<0.001)及比例(P<0.01)均显著降低;细胞亚群分析显示,CKO小鼠外周血CD3+淋巴细胞及B220+淋巴细胞显著减少(P<0.01,P<0.001),CD11b+髓系细胞比例显著增加(P<0.01)。HE染色显示,实验组鼠胸腺和脾淋巴细胞数减少。克隆形成实验显示,实验组小鼠粒系克隆数无差异,前B细胞样克隆缺失。结论 造血干细胞中Hdac3基因促进造血干细胞向淋巴细胞分化。
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