【摘 要】
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目的:比较不同方法提取小鼠腹腔巨噬细胞的生物学特性并筛选出高效的提取方法。方法:选取32只健康昆明小鼠,随机分为4组,每组8只,分别采用以下4种不同方法获得腹腔巨噬细胞:P
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81670405);江苏省自然科学基金资助项目(BK20161355);镇江市2018年度科技创新资金项目(SS2018008)
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目的:比较不同方法提取小鼠腹腔巨噬细胞的生物学特性并筛选出高效的提取方法。方法:选取32只健康昆明小鼠,随机分为4组,每组8只,分别采用以下4种不同方法获得腹腔巨噬细胞:PBS直接灌洗小鼠腹腔(PBS组);含10%血清的RPMI 1640培养液注入小鼠腹腔,30 min后灌洗小鼠腹腔(培养液组); 6%淀粉肉汤注入小鼠腹腔,每天1次,3 d后以PBS灌洗腹腔(淀粉肉汤组); 3%巯基乙酸盐肉汤注入小鼠腹腔,每天1次,3 d后以PBS灌洗腹腔(巯基乙酸盐组);将各组所获细胞分别转入含10%血清的RPMI 1640培养基中贴壁培养,比较细胞形态、数量、吞噬能力、纯度以及活性。结果:4组巨噬细胞的形态无明显差异;与其他3组相比,巯基乙酸盐组诱导所得的细胞数量最多(t=16. 685,9. 361,3. 199,P均<0. 01),且吞噬能力最强(t=5. 675,3. 712,3. 026,P均<0. 01); 4组巨噬细胞的F4/80、CD68表达率以及活性均相似且高于95%,差异无统计学意义(F=0. 696,0. 647,0. 341,P均>0. 05)。结论:3%巯基乙酸盐肉汤诱导小鼠腹腔巨噬细胞后灌洗,是一种获取大量小鼠腹腔巨噬细胞的高效方法。
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