探讨CORM-2通过p38分裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)信号通路对脂多糖(LPS)刺激大鼠肺巨噬细胞中线粒体分裂蛋白Fis1的影响。
方法将传代培养的大鼠肺泡巨噬细胞以2×105/mL密度接种于96孔板。培养24 h后,采用随机数字表法将其分为4组:正常对照组(C组)、LPS组(L组)、CO释放剂CORM-2+LPS组(LC组)、p38MAPK抑制剂SB203580+CORM-2+LPS组(LCS组)。细胞孵育24 h时,应用试剂盒测定线粒体MDA含量及SOD活力,应用Western blot测定HO-1、线粒体相关分裂蛋白Fis1和p38的表达。应用RT-PCR测定HO-1和Fis1 mRNA含量的表达。
结果与C组比较,L组MDA[2.43±0.12 vs. 3.59±0.07]含量、HO-1[1.31±0.27 vs. 1.65±0.41]、Fis1[1.27±0.23 vs. 1.65±0.41]、p38[1.01±0.24 vs. 1.36±0.17]表达水平升高,SOD[81.7±1.62 vs. 54.7±1.62]活力降低(P<0、05);与L组比较,LC组MDA[3.59±0.07 vs. 3.08±0.52]含量、Fis1[2.01±0.35 vs. 1.48±0.39]表达水平降低,SOD[54.7±1.62 vs. 67.4±1.32]活力、HO-1[1.65±0.41 vs. 2.25±0.18]、p38[1.36±0.17 vs. 1.78±0.23]表达水平升高(P<0、05);与LC组比较,LCS组MDA[3.08±0.52 vs. 4.16±0.19]含量、Fis1[1.48±0.39 vs. 1.96±0.31]表达水平升高,SOD[67.4±1.32 vs. 45.9±1.52]活力、HO-1[2.25±0.18 vs. 1.78±0.19]、p38[1.78±0.23 vs. 1.12±0.29]表达水平降低(P<0、05)。
结论HO-1/CO抑制LPS刺激大鼠肺巨噬细胞中线粒体分裂蛋白Fis1表达机制与p38MAPK信号通路有关。