【摘 要】
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为表达非洲猪瘟病毒(ASFV)P30蛋白,本研究采用PCR方法扩增ASFVp30基因,并克隆至pOET-1载体中构建重组质粒pOET-P30,将其与t/ashBACDNA共转染Sf9昆虫细胞,制备了表达P30蛋白的重组杆
【机 构】
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中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心
【基金项目】
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公益性行业(农业)科研专项(200903037)
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为表达非洲猪瘟病毒(ASFV)P30蛋白,本研究采用PCR方法扩增ASFVp30基因,并克隆至pOET-1载体中构建重组质粒pOET-P30,将其与t/ashBACDNA共转染Sf9昆虫细胞,制备了表达P30蛋白的重组杆状病毒,并通过SDS-PAGE和westernblot对重组杆状病毒进行鉴定。结果显示,表达的重组蛋白约为30ku,能够与His标签单克隆抗体和ASF阳性血清发生特异性反应。以纯化的重组P30蛋白包被ELISA板对相关抗体进行检测,结果显示该重组蛋白仅与ASFV阳性血清发生反应,而与其他疫
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