高效液相色谱法测定大鼠血浆中咪达唑仑含量

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目的建立检测大鼠血浆中咪达唑仑质量浓度的高效液相色谱法。方法取大鼠20只,一次性给予尾静脉注射咪达唑仑10 mg/kg,分别于给药后0 min,5 min,10 min,20 min,30 min,1 h,1.5 h,2 h,4 h,6 h时眼内眦取血,采用高效液相色谱法检测其血药浓度。采用Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(62∶38),流速1.0 mL/min,检测波长225 nm,柱温30℃,进样量20μL。结果咪达唑仑的保留时间为6.7 min,回归方程为Y=0.075 2 X-0.004 2(r=0.999 9,n=7),检测质量浓度的线性范围为0.1~30 mg/L。低、中、高3种质量浓度血浆样品的绝对回收率分别为(109.8±4.54)%,(101.6±3.28)%和(104.9±4.30)%;日内RSD分别为2.86%,4.38%,3.54%,日间RSD分别为3.25%,3.17%,3.14%;咪达唑仑血浆样品-40℃保存3 d及反复冻融3次,性质稳定,血浆样品处理后放置4 h对测定无影响。20只大鼠血浆样品中咪达唑仑的平均质量浓度为(8.78±2.18)mg/L。结论该方法简便、准确、灵敏度高、重现性好,可用于大鼠血浆中咪达唑仑浓度的测定。
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