肌酸激酶亚基提纯及抗血清制备

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<正> 肌酸激酶(CK)同工酶作为诊断心肌梗塞的敏感指标之一,已为国内外所积累的大量临床资料所证实。近年来采用放射免疫分析法和免疫抑制试验,检测血清中CKM 和 CKB 亚基构成的3种同工酶(CKMM,CKMB,CKBB),已成为临床诊断和鉴别诊断心血管和神经肌肉系统疾病的重要手段。为促进上述新技术在临床上的应用,现报导我们提纯 CKMM 和 CKBB 及抗血清制备的工艺流程,供研究参考。材料和试剂1.人胎儿骨骼肌及脑组织,取自流产(6,5个月)胎儿。 2.DEAE 葡聚糖 G25(Pharmacia 产品,分装批号78—11—01)。3.羊抗正常人血清蛋白抗体,本室自制。4.有关 CK 总酶活性测定试剂,参见Hughes 氏比色法。5.缓冲液Ⅰ:0.05M pH7.4 Tris-HCl,10mM NaCl,1mM 巯基乙醇溶液。6.缓冲液Ⅱ:0.05M pH8.0 Tris-HCl,100mM NaCl,1mM 巯基乙醇溶液。
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