红霉素软膏作为抗生素类软膏，首先用于治疗和预防皮肤感染。脓疱疮等化脓性皮肤病及溃疡面的感染可以使用红霉素软膏，它也可用于皮肤黏膜交界的部位，如口周和肛周等处的感染。用法一般是1日2次，薄涂于患处。除了抗感染之外，红霉素软膏还有其他一些用途。
　　轻微创伤：如身体轻微挫伤、划伤或其他创伤都可使用红霉素软膏，一般用法是将患处清洗消毒，之后将适量药膏涂于患处，1日2次。
　　轻度烧烫伤：小面积的烧伤、烫伤可以先用冷水冲洗一下伤口，然后在表面薄涂一层红霉素软膏。
　　蚊虫叮咬：蚊虫叮咬的情况较严重时，应当及时清洗并消毒被叮咬的局部，取适量本药膏涂抹，每日2次，连用5-7天。
　　流鼻血：干燥的天气会让一些人原本干燥的鼻黏膜更加脆弱，于是流鼻血的现象时有发生。这时不妨用红霉素软膏适量涂抹鼻中隔部位，每日4-5次，可以消毒、软化鼻腔，滋润鼻黏膜，改善鼻腔内环境，预防再次出血。涂抹的量不要过多，以防药膏倒流进口中。
　　口角炎：口角炎多因感染引起，以学龄前儿童多见。细菌性口角炎可以涂抹少量红霉素软膏，同时服用维生素B2。
　　需要注意的是，虽然红霉素软膏应用广泛，但它对真菌感染引起的皮肤病，如头癣、甲癣、股癣和手足癣等却不起作用。红霉素软膏偶尔也会导致一些不良反应，如局部烧灼感、干燥、发痒、红斑，偶见荨麻疹样反应。如果出现了上述不良反应，应立即停止使用。