携带K5基因突变体的腺病毒构建及K5蛋白表达

来源 :复旦学报：医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：qhp168

【摘要】

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目的对血管生成抑制因子纤溶酶原Kringle 5（K5）基因进行突变,构建于重组腺病毒中,并观察突变后K5蛋白的表达情况。方法用重叠延伸技术对K5基因Furin蛋白酶水解识别位点进行定点

【作者】

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刘岩刘芳叶迅董继斌陆琴李秋华陈红专

【机构】

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复旦大学附属华山医院眼科,复旦大学药学院生物化学教研室,上海交通大学医学院药理学教研室

【出处】

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复旦学报：医学版

【发表日期】

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2008年6期

【关键词】

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腺病毒 KRINGLE5 Furin蛋白酶 adenovirus Kringle 5 furin protease

【基金项目】

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上海市自然科学基金项目（032214116）

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目的对血管生成抑制因子纤溶酶原Kringle 5（K5）基因进行突变,构建于重组腺病毒中,并观察突变后K5蛋白的表达情况。方法用重叠延伸技术对K5基因Furin蛋白酶水解识别位点进行定点突变,分别构建携带K5基因和突变后的K5m基因表达框的腺病毒载体Ad-EF1-αK5/K5m;用RT-PCR法比较腺病毒感染TC-1细胞后K5和K5m mRNA的表达;用免疫沉淀和Western blot法比较腺病毒感染TC-1细胞后K5蛋白和突变后K5蛋白的表达。结果成功对K5基因进行点突变,携带K5突变基因腺病毒K5蛋

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