【摘 要】
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目的探讨点突变对结核分支杆菌KatG蛋白过氧化氢-过氧化物酶活性和蛋白结构的影响,深入研究INH耐药的发生机制.方法采用三步法PCR对KatG基因的4个位点进行定点诱变,在大肠埃
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目的探讨点突变对结核分支杆菌KatG蛋白过氧化氢-过氧化物酶活性和蛋白结构的影响,深入研究INH耐药的发生机制.方法采用三步法PCR对KatG基因的4个位点进行定点诱变,在大肠埃希菌BL21体系中表达和纯化相应诱变蛋白,并测定其过氧化氢酶、过氧化物酶活性、二硫键的形成及荧光光谱变化,最后利用酵母细胞色素C氧化酶模型进一步探讨点突变对KatG蛋白过氧化氢-过氧化物酶活性和结构的影响.结果完成KatG基因4个位点的诱变及相应诱变蛋白的表达和纯化.过氧化氢酶、过氧化物酶活性测定发现3个诱变蛋白[KatG(W32
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