【摘 要】
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目的建立检测丙型肝炎病人血清HCVRNA水平的竞争性逆转录-聚合酶链式反应定量方法.方法采用含HCV5非编码区(5NCR)缺失突变的重组质粒5T1d,将其目的基因亚克隆到体外转录载体p
【机 构】
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解放军476医院,福建,福州,350002;第一军医大学南方医院,广东,广州,510515;
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目的建立检测丙型肝炎病人血清HCVRNA水平的竞争性逆转录-聚合酶链式反应定量方法.方法采用含HCV5非编码区(5NCR)缺失突变的重组质粒5T1d,将其目的基因亚克隆到体外转录载体pCDNAⅠ多克隆位点上,获得转录重组体5T1d.将其线性化后用SP6RNA聚合酶体外转录竞争性缺失突变模板RNA,该模板定量后与血清HCVRNA一起作逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),建立检测血清HCVRNA水平的竞争性定量方法.结果检测15例丙肝病人20份血清,滴度为6.6×102～6.6×106copies/ml.结论各类丙型肝炎患者血清病毒滴度均较高,经干扰素治疗后病毒水平下降1～5个Log,年龄小于20岁者干扰素治疗效果较好.
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