【摘 要】
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目的 观察黄芪-莪术-重楼配伍对人脐静脉内皮细胞株（HUVEC）通透性与细胞紧密连接的影响及其抑制人结肠癌细胞系（HCT116）血行转移的作用机制。方法 制备空白对照血清和黄芪-莪术-重楼配伍含药血清。构建HUVEC-HCT116共培养体系,实验分为共培养模型组,黄芪-莪术-重楼配伍低、中、高剂量(2.1、4.2、8.4 g·kg-1)组。另设HUVEC单培养对照组。CCK-8法检测细胞增殖;FI
【机 构】
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南京中医药大学中医学院·中西医结合学院
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（81873021）； 江苏省中医药科技发展专项（2020ZX01）； 1764）','2202','QIyqhg8I9xaeK6_Vq5fuaDEeGhXGm9BpJ_-1fd6jFQ7lwMymBSl5uw==');
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目的 观察黄芪-莪术-重楼配伍对人脐静脉内皮细胞株（HUVEC）通透性与细胞紧密连接的影响及其抑制人结肠癌细胞系（HCT116）血行转移的作用机制。方法 制备空白对照血清和黄芪-莪术-重楼配伍含药血清。构建HUVEC-HCT116共培养体系,实验分为共培养模型组,黄芪-莪术-重楼配伍低、中、高剂量(2.1、4.2、8.4 g·kg-1)组。另设HUVEC单培养对照组。CCK-8法检测细胞增殖;FITC-dextran法、Transwell法检测HUVEC通透性与HCT116跨内皮迁移数量;免疫荧光法检测ZO-1蛋白的分布;Western blot法检测RhoA、ROCK及ZO-1蛋白表达量。结果 黄芪-莪术-重楼配伍不同剂量含药血清处理48 h后,HUVEC增殖均显著减少（P<0.01）。与单培养对照组相比,共培养模型组FITC-dextran渗透量、跨越内皮迁移的HCT116细胞数量明显增加（P<0.01）,ZO-1蛋白表达下调（P<0.01）,RhoA、ROCK蛋白表达上调（P<0.01）;与共培养模型组相比,黄芪-莪术-重楼配伍各剂量组FITC-Dextran渗透量、跨越内皮迁移的HCT116细胞数量均减少（P<0.05）,ZO-1蛋白表达上调（P<0.05）,RhoA、ROCK蛋白表达下调（P<0.05）,且呈现剂量依赖性。结论 黄芪-莪术-重楼配伍可能通过抑制RhoA/ROCK通路调控HUVEC紧密连接相关蛋白ZO-1的表达,降低血管内皮通透性,进而抑制结肠癌血行转移。
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