鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因转染小鼠黑色素瘤B16F1细胞

来源 :江西医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:danan1234
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目的:探讨基因转移载体脂质体介导转染的鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(mGM-CSF)基因在B16F1细胞的表达动态及表达产物的生物活性.方法:脂质体和质粒DNA复合后,转染106 B16F1细胞,连续5d换细胞培养液,并检测其中的mGM-CSF含量.采用[3HTdR]渗入法,测定DA1G细胞和转染后第一天收获的以1:10对倍稀释到1:640的上清液及[3HTdR]混合培养后,渗入到DA1G细胞的[3HTdR]量(cpm),以分析表达产物的生物活性.结果:转染B16F1细胞的mGM-CSF基因得到有效表达.但随着时间的推移,表达由第1天的135 ng/ml下降到第5天的42.2 ng/ml.渗入到DA1G细胞的[3HTdR]量(cpm)随上清液的稀释而逐步下降,由1:10稀释度的9371下降到1:640时的3251.和DMEM混合培养的DA1G细胞的[3HTdR]渗入量(cpm)仅为472.结论:脂质体作为基因转移载体可有效地介导mGM-CSF基因转染B16F1细胞,并获得有生物活性的表达.
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