【摘 要】
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目的:原核表达脑源性神经营养因子前体( proBDNF )基因重组蛋白,并检测其生物学活性。方法通过PCR方法扩增大鼠点突变型基因的脑源性神经营养因子前体的cDNA,克隆到质粒pET-28a中,
【机 构】
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第三军医大学大坪医院野战外科研究所神经内科
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目的:原核表达脑源性神经营养因子前体( proBDNF )基因重组蛋白,并检测其生物学活性。方法通过PCR方法扩增大鼠点突变型基因的脑源性神经营养因子前体的cDNA,克隆到质粒pET-28a中,在大肠杆菌BL21中表达,其表达产物经Western印迹方法鉴别,用DAPI法检测其对PC12细胞凋亡的影响。结果重组基因的扩增产物在大肠杆菌中获得表达,表达产物符合目的蛋白分子量并能够与特异性抗体反应。原核表达的proBDNF基因重组蛋白能够诱导PC12细胞的凋亡。结论成功地在大肠杆菌BL21中表达了proBDNF基因重组蛋白,该蛋白能够对促进PC12细胞的凋亡,具有生物毒性。
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