标化消减杂交:提高差异表达cDNA筛选效率的新策略

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在回顾分析了消减杂交技术改进历程的基础上,我们提出了"标化消减杂交策略".此策略的核心是"用标化cDNA制备消减杂交反应的单链驱动子和单链示踪子,分离回收消减杂交后的单链示踪子用于制备差异表达cDNA文库,并从标化cDNA文库制备探针来对差异表达cDNA文库进行检测",将主要用于筛选与细胞特殊表型密切相关的(或与不同发育阶段等密切相关的)呈"全或无"差异形式表达的低丰度全长cDNA.此策略有望能较以往的消减杂交策略在降低假阳性背景、提高低丰度差异表达cDNA获得率、得到较长甚至全长差异表达cDNA等方面有较好表现,但尚待检验.
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