【摘 要】
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目的观察丹参对高浓度铁离子环境下的MC3T3-E1小鼠前成骨细胞的凋亡、成骨分化、矿化能力的影响，并探讨其中的作用机制。方法在培养基中加入200 μmol/L的枸橼酸铁铵(FAC)模拟铁过载(F组)，然后以75～300 mg/L浓度梯度的丹参加入高铁培养液中(DF1、DF2、DF3组)；茜素红染色法检测各组钙结节生成；流式细胞术检查细胞凋亡率改变；实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测各组成
【机 构】
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215004 苏州大学附属第二医院中医骨伤科,215004 苏州大学附属第二医院骨科,215004 苏州大学附属第二医院中医骨伤科,215004 苏州大学附属第二医院中医骨伤科,215004 苏州大学
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目的观察丹参对高浓度铁离子环境下的MC3T3-E1小鼠前成骨细胞的凋亡、成骨分化、矿化能力的影响，并探讨其中的作用机制。
方法在培养基中加入200 μmol/L的枸橼酸铁铵(FAC)模拟铁过载(F组)，然后以75～300 mg/L浓度梯度的丹参加入高铁培养液中(DF1、DF2、DF3组)；茜素红染色法检测各组钙结节生成；流式细胞术检查细胞凋亡率改变；实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测各组成骨相关基因骨钙素(BGP)、Runt相关基因2(Runx2)、Ⅰ型胶原α链(COL1A) mRNA表达。用Western blot法检测磷酸化p38(p-p38)表达。
结果茜素红染色结果提示DF2组的钙结节生成率明显大于F组；在高铁培养环境中加了不同浓度丹参(DF1、DF2、DF3组)的细胞凋亡率小于高铁组(F组)[(2.68±0.60)%、(2.21±0.49)%、(1.35±0.11)%比(8.34±0.31)%，F＝145.160，P＝0.000]；经过FQ-PCR检测，在高铁环境中加了不同浓度丹参组的BGP、Runx2、COL1A mRNA表达量均比高铁组明显增加(1.95±0.04、2.08±0.17、2.78±0.10比0.78±0.08；0.64±0.02、0.75±0.02、0.83±0.03比0.58±0.02；0.39±0.02、0.74±0.02、0.94±0.02比0.35±0.03)；p-p38蛋白的表达量高铁组低于高铁加丹参组(0.42±0.03比0.30±0.01，F＝126.370，P＝0.000)。
结论丹参能拮抗高浓度铁离子环境对MC3T3-E1细胞的成骨分化、矿化的抑制作用，并且减少细胞凋亡，其中的作用机制可能是丹参抑制了p38信号通路的激活。
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