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目的
利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对乙型肝炎病毒(HBV)的特定基因进行编辑，评价其抑制HBV复制的效应。
方法针对HBV的S基因设计2套CRISPR/Cas9表达质粒并转染HepG2-N10细胞株。采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞毒性、化学发光法检测HBsAg、荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)法检测病毒mRNA表达水平，荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测HBV DNA含量，高通量测序分析HBV基因组编辑情况。
结果未见明显细胞毒性效应；2套针对HBV的CRISPR/Cas9表达质粒组培养基中HBsAg含量较对照组降低了24.2%(P＝0.031)和16.9%(P>0.05)，细胞中HBsAg含量分别降低了16.4%(P>0.05)和32.1%(P>0.05)；S、C、X基因mRNA基因表达呈现不同程度降低；培养上清中HBV DNA含量较对照组降低了23%(P>0.05)和35%(P＝0.047)，细胞中HBV DNA含量降低了7.2%(P>0.05)和18%(P>0.05)；高通量测序提示HBV基因组出现不同类型的插入/缺失突变。
结论针对HBV的S基因设计的2套CRISPR/Cas9表达质粒能通过对HBV基因组的编辑实现抑制HBV基因表达及病毒复制作用，可能为HBV治疗提供新的途径。