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目的建立测定庆大霉素普鲁卡因维B12颗粒中盐酸普鲁卡因含量的方法。方法用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，水-乙腈-三乙胺（85：15：0．02，用冰醋酸调pH值至3．9）为流动相，检测波长为292nm，流速为1．0mL／min。结果盐酸普鲁卡因进样量在2、048～36．864μg范围内与峰面积线性关系良好，回归方程为Y=44329X＋5031，r=0．9999（n=6），平均回收率为100．30％，RSD=1．05％（n=6）。结论高效液相色谱法可用于庆大霉素普鲁卡因维B12颗粒中盐酸普鲁卡因的含量控制。