【摘 要】
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目的:探讨长链非编码RNA PIK3CD-AS1在肾癌细胞与正常肾脏细胞中的差异表达及其对肾癌细胞增殖和凋亡能力的影响,并寻找与PIK3CD-AS1功能相关的基因。方法:运用qRT-PCR检测PI
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目的:探讨长链非编码RNA PIK3CD-AS1在肾癌细胞与正常肾脏细胞中的差异表达及其对肾癌细胞增殖和凋亡能力的影响,并寻找与PIK3CD-AS1功能相关的基因。方法:运用qRT-PCR检测PIK3CD-AS1在正常肾脏细胞(HK-2)与肾癌细胞(769-P、786-O、A498)中的表达差异;将PIK3CD-AS1过表达载体转染入肾癌769-P细胞,构建PIK3CD-AS1稳定过表达的细胞株,通过CCK-8实验及流式细胞术检测PIK3CD-AS1过表达对肾癌细胞增殖和凋亡能力的影响,通过凋亡相关基因表达谱芯片寻找与PIK3CD-AS1功能可能相关的基因。结果:与正常肾脏细胞HK-2相比,PIK3CD-AS1在肾癌细胞(769-P、786-O、A498)中表达明显下降(P<0.01或P<0.05)。成功构建PIK3CD-AS1过表达细胞株,经qRT-PCR验证,实验组细胞中PIK3CD-AS1表达量较阴性对照明显升高(P<0.05)。增殖实验及凋亡实验表明,实验组细胞的增殖能力显著下降(P<0.01),同时细胞凋亡显著增多(P<0.01)。凋亡基因表达谱芯片筛选结果显示,与PIK3CD-AS1相互作用进而促进肾癌细胞凋亡的基因有DFFA、BCL2L1、CASP9。结论:PIK3CD-AS1可能为抑癌基因,在肾癌细胞中呈现低表达状态。PIK3CD-AS1可抑制肾癌细胞的增殖并促进凋亡,其促凋亡功能可能与CASP9、DFFA、BCL2L1基因有关。
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