【摘 要】
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目的通过CRISPR/Cas9获得UOX基因敲除的小鼠纯合品系,为建立高尿酸血小鼠动物模型奠定基础。方法根据小鼠UOX基因第三外显子前后两个位点设计双sgRNA,通过PCR、体外转录和纯
【机 构】
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常州卡文斯实验动物有限公司,江苏科标医学检测有限公司,百格基因科技（江苏）有限公司
【基金项目】
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常州市科技计划:高效目的基因的构建及囊胚腔注射稳定性对基因打靶成功的影响(201504820)
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目的通过CRISPR/Cas9获得UOX基因敲除的小鼠纯合品系,为建立高尿酸血小鼠动物模型奠定基础。方法根据小鼠UOX基因第三外显子前后两个位点设计双sgRNA,通过PCR、体外转录和纯化获得sgRNA和Cas9 mRNA。将sgRNA和Cas9 mRNA显微注射进小鼠原核胚后,体外培养至二细胞胚阶段,进行胚胎移植至代孕母鼠。F0代小鼠出生后,提取其DNA进行电泳分析和测序分析。F0代交配繁殖至F2代获得UOX缺失的小鼠纯合品系。结果显微注射sgRNA和Cas mRNA至原核胚,成功获得50枚囊胚。移植后
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