PRV SD株gE基因主要抗原区域原核表达及间接ELISA方法的建立

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参考猪伪狂犬病病毒(PRV)SD株gE基因序列,设计1对引物,通过PCR方法扩增一段包含gE主要抗原表位编码区的618bp片段,将其用BamHⅠ和XhoLI双酶切后,插入到原核表达载体pET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),进行表达、SDS-PAGE电泳、Western-blot检测和纯化;利用表达的PRVSDgE蛋白进行gE-ELISA鉴别检测方法研究。结果发现:gE重组蛋白得到了高效表达,融合蛋白的分子量约为42ku;表达产物存在于上清液中,表达量可达菌体总蛋白的30%以上,并且能被P
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