RanGTPase激活蛋白RanGAP在嗜热四膜虫细胞中的定位及功能

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nyffyn
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RanGTPase激活蛋白(RanGTPase-activatingprotein,RanGAP)和Ran相互作用,提高了RanGTPase水解GTP的效率.RanGAP参与细胞内核质运输、纺锤体组装、核膜重建和异染色质的组装.生物进化过程中,不同生物的RanGAP表现出结构和功能的多样性.本研究从嗜热四膜虫大核基因组中鉴定出1个保守的RanGTPase激活蛋白基因RanGAP(TTHERM00766430).实时荧光定量PCR表明,RanGAP在四膜虫营养生长、饥饿和有性生殖过程中均有表达,且在有性生殖46h表达水平最高.免疫荧光定位表明,在营养生长期、饥饿期及有性生殖的早期,RanGAP定位于细胞质中;在有性生殖后期,RanGAP定位于凋亡的大核中.过表达RanGAP的细胞增殖速率下降,大核分裂和胞质缢缩异常,产生无大核细胞.敲减RanGAP的细胞大核形态异常,细胞增殖速率下降,无丝分裂受到抑制,进而产生无大核细胞.RanGAP的过表达或敲除分别引起四膜虫RAN1,RanBP1和RCC1基因的表达下调或上调.结果表明,RanGAP通过Ran信号通路调控了嗜热四膜虫无性生殖过程中大核的无丝分裂,并可能参与了有性生殖过程中亲本大核的凋亡.
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