【摘 要】
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为了构建猪输血传播病毒2型(TTV2) ORF1基因部分片段的原核表达载体,进行原核表达,并利用重组蛋白质制备猪TTv2的多克隆抗体,采用PCR方法扩增出猪TTV2 ORF1基因的部分片段,将其
【机 构】
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江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京农业大学动物医学院
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(31272574),江苏省农业自主创新基金项目[CX(11)2060]
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为了构建猪输血传播病毒2型(TTV2) ORF1基因部分片段的原核表达载体,进行原核表达,并利用重组蛋白质制备猪TTv2的多克隆抗体,采用PCR方法扩增出猪TTV2 ORF1基因的部分片段,将其克隆至原核表达载体pcoldI中,构建原核表达质粒pcold-gl,然后转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达.表达产物通过镍离子亲和层析柱进行纯化,用Western blot进行鉴定.将纯化的重组蛋白质免疫新西兰大白兔制备猪TTV2多克隆抗体,Western blot检测抗体特异性,间接ELISA
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