人甘油激酶慢病毒干涉载体的构建和表达

来源 :南方医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：handsomenijun

【摘要】

：

目的构建人甘油激酶（GK）基因RNA干扰（RNAi）慢病毒载体,获得稳定下调GK表达的慢病毒。方法将具有干涉效果的siRNA序列克隆入慢病毒核心质粒pSicoR中,并转染293T细胞进行病毒包装,

【作者】

：

刘悦郝玉娥詹轶群许望翔杨永升葛常辉

【机构】

：

天津大学制药工程系,军事医学科学院放射与辐射医学研究所,南方医科大学基础医学院

【出处】

：

南方医科大学学报

【发表日期】

：

2012年5期

【关键词】

：

甘油激酶慢病毒肝细胞重组质粒 RNA干扰

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目的构建人甘油激酶（GK）基因RNA干扰（RNAi）慢病毒载体,获得稳定下调GK表达的慢病毒。方法将具有干涉效果的siRNA序列克隆入慢病毒核心质粒pSicoR中,并转染293T细胞进行病毒包装,用慢病毒感染293T细胞并应用FACS测定病毒滴度。以GK干涉慢病毒感染人肝细胞系L02细胞后,应用Western blotting方法检测GK的表达。结果成功构建GK干涉慢病毒pSicoR-GK载体并获得慢病毒颗粒,病毒滴度检测可达3×107pfu/ml,GK蛋白质表达水平下调至对照的约20%。结论成

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