SV40LTag诱导鼠骨骺软骨细胞稳定分化的实验研究

来源 :中国当代儿科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tanglang1
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目的建立稳定分化大鼠骨骺软骨细胞株,为细胞替代治疗和基因治疗小儿生长发育迟缓提供稳定的细胞来源。方法利用脂质体介导的基因转染技术将含有猿肾病毒40大T抗原(simian virus 40 large T antigen gene,SV40LTag)基因的质粒pEGFP—IRES2-SV40LTag转染原代培养的新生大鼠骨骺软骨细胞,G418筛选,抗性克隆扩大培养传代。应用Ⅱ型胶原、X型胶原和SV40LTag抗体进行细胞鉴定,体外检测其分化能力,观察细胞的形态及其生长状况,绘制细胞生长曲线。用RT-PCR、
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