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目的：构建 E3泛素连接酶环指蛋白146（RNF146）基因真核表达载体，研究 RNF146对非小细胞肺癌细胞系体外生物学行为的影响。方法采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白印迹法筛选 RNF146低表达细胞系。构建 pEX4-RNF146真核表达载体，经酶切和测序后瞬时转染 LTE 细胞，荧光显微镜观察、蛋白印迹法检测转染效率。四甲基偶氮唑盐（MTT）比色实验检测肿瘤细胞体外增殖能力，划痕实验评价肿瘤细胞体外迁移能力，Buyden 小室实验检测肿瘤细胞体外侵袭能力。结果酶切和基因测序证实重组质