二甲双胍对骨肉瘤MG63细胞增殖及蛋白激酶B、叉头框转录因子O亚族1表达的影响

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:foxdeng
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读

目的 观察二甲双胍对骨肉瘤细胞增殖及蛋白激酶B(Akt)信号通路中Akt、叉头框转录因子O亚族1(FoxO1)蛋白磷酸化的影响,探讨二甲双胍抑制骨肉瘤细胞增殖的作用机制.方法 以骨肉瘤MG63细胞株为研究对象,采用含有10%胎牛血清的RPMI 1640培养液在体外培养至细胞融合达70%时,更换终质量浓度为50 mmol/L的不含血清的培养液继续培养,在加入实验剂量的二甲双胍后12、24、36、48、72 h分别采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞的增殖,收获24 h的细胞,提取总蛋白后采用Western blot检测Akt、磷酸化Akt (p-Akt)、FoxO1、磷酸化FoxO1(p-FoxOl)的表达.结果 二甲双胍可显著抑制MG63细胞增殖,呈明显的时间依赖性,用药48 h后,MG63细胞内Akt、FoxO1的磷酸化水平明显下降.二甲双胍组的p-Akt和对照组的p-Akt水平分别为0.62 ±0.04和1.33±0.16(P<0.05),二甲双胍组的p-FoxO1和对照组的p-FoxO1水平分别为0.82 ±0.02和1.71±0.05(P <0.05).结论 二甲双胍可通过Akt/FoxOl信号通路的去磷酸化而抑制MG63细胞的增殖。

其他文献
目的 观察七氟醚联合胸段硬膜外阻滞对非体外循环冠状动脉搭桥术(OPCABG)患者心肌损伤的影响.方法 拟行OPCABG患者40例,性别不限,年龄<60岁,美国麻醉医师协会评分标准(A SA)分级Ⅱ或Ⅲ级,采用随机数字表法,将患者随机分为2组(n=20):对照组(C组)和实验组(SE组),每组20例.SE组于T4~T5间隙行硬膜外穿刺,穿刺成功后向头端置入硬膜外导管4 cm,固定硬膜外导管.SE组患
目的 构建血红素氧化酶-1(HO-1)基因的真核过表达载体,观察转染人结肠癌细胞株Caco-2细胞后对其生长的影响和细胞定位.方法 构建人pShuttle-CMV-HO1载体,经测序、酶切鉴定正确后,采用脂质体转染法将载体转入Caco-2细胞中,经G418筛选并建立稳定过表达Caco-2细胞HO-1基因的细胞株.实验分为2组,分别为实验组(Caco-2-pS/HO-1)、对照组(Caco-2-pS
目的 观察细胞窖蛋白-1(Cav-1)在人胰腺癌中的表达,探讨Cav-1在人胰腺癌中的表达及其临床意义.方法 Western blot检测人胰腺癌细胞株(MDA48、MDA28等)和人胰腺导管上皮(HPDE)细胞株中Cav-1蛋白的表达.免疫组织化学检测组织芯片中70例人胰腺癌和10例正常胰腺组织中Cav-1的表达,并分析其与胰腺癌临床病理特征的关系.结果 Western blot结果显示Cav-
白色芸豆防御素(defensin-byd)由Wong等[1]于2006年分离鉴定,体外实验显示其具有显著的抗乳腺癌细胞增殖作用,但其对肺癌的作用尚不清楚.本研究旨在观察其对肺癌细胞株A549的作用.一、材料与方法1.defensin-byd、顺铂(cisplatin)及defensin-byd/cisplatin对A549细胞增殖的影响:取对数生长期的A549细胞(中国科学院细胞所)按每孔5×10
期刊
目的 探讨性激素失衡在男性肝移植患者术前评估中的临床意义.方法 选取2011年6月至2013年6月原位同种异体肝移植男性患者71例作为观察对象,根据原发病分为两组:肝癌组35例,肝硬化失代偿组36例.另选取健康男性20例作为对照组.采用放射免疫法测定观察对象术前及对照组血清泌乳素、雌二醇、睾酮含量并计算雌二醇/睾酮比值(E2/T),采用单因素方差分析比较各组间差异.结果 与对照组[(6.79 ±2
目的 探讨钾离子反复刺激大鼠膀胱组织增加大鼠膀胱逼尿肌收缩敏感性与RhoA/Rho激酶途径的相关性.方法 雌性SD大鼠20只,随机分为刺激组和对照组,每组10只.刺激组:膀胱内灌注硫酸鱼精蛋白(10 g/L)及氯化钾溶液(500 mmol/L),每3d灌注1次,共20次,为期2个月.对照组:同样方法灌注生理盐水.2个月后两组分别行膀胱尿动力学检查.取两组大鼠膀胱逼尿肌组织,用于观察预收缩后Y-27
目的 通过肥大细胞与肺成纤维细胞接触和非接触共体培养,观察肥大细胞对肺成纤维细胞增殖、转化及功能的影响.方法 分离大鼠肺成纤维细胞和腹腔肥大细胞,实验分为3组:接触共育组、非接触共育组、对照组.计数各组肺成纤维细胞数量,通过免疫细胞化学方法检测肌成纤维细胞特异性标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),噻唑蓝(MTT)比色法测定肺成纤维细胞增殖率,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测培养液中Ⅰ型
目的 观察干扰素应答因子1(IRF-1)基因对不同p53状态骨肉瘤细胞凋亡的调节作用,并探讨其机制.方法 利用U2OS(p53+/+)和Saos2(p53-/-)骨肉瘤细胞作为研究模型,用不同剂量阿霉素处理后,Western blot检测IRF-1表达的变化.进一步通过过表达IRF-1基因或敲除IRF-1基因,检测其对骨肉瘤细胞凋亡的影响.并通过实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测I
目的 探索安全有效、简单易行的后腹腔镜下肾脏低温保护技术.方法 拟行后腹腔镜下保留肾单位手术患者22例,分为研究组和对照组.研究组在后腹腔镜肾脏低温下行保留肾单位手术;对照组行常规后腹腔镜下保留肾单位手术.比较两组患者肾脏温度和直肠温度变化以及手术前后肾功能变化.结果 22例患者手术顺利;术后无继发出血、感染及漏尿.研究组冷缺血时间为(47.2±3.8)min,平均最低肾脏温度为(17.73±0.
目的 观察他莫昔芬(TAM)联合MCF-7细胞株上清对MDB-DA231细胞株存活率的影响.方法 细胞计数试剂盒(CCK-8)检测TAM对MCF-7和MDA-MB-231杀伤能力的差异;CCK-8及流式细胞仪(FCM)检测MCF-7细胞株上清对MDB-DA231细胞株存活率的影响以及MCF-7细胞株上清联合TAM对MDB-DA231细胞株存活率的影响.结果 在15 μmol/L TAM培养条件下,