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目的
评价α硫辛酸对人皮肤成纤维细胞自噬水平的影响。
方法人皮肤成纤维细胞与终浓度分别为0、0.05、0.10、0.15、0.20和0.50 mmol/L的α硫辛酸孵育4、12和24 h后,采用噻唑蓝法检测细胞增殖活性,单丹酰戊二胺(MDC)染色法检测细胞自噬水平,Western印迹法检测微管相关蛋白1轻链3-B (LC3-B)表达。
结果孵育4 h和12 h时,0、0.05、0.10、0.15、0.20和0.50 mmol/L α硫辛酸组间人皮肤成纤维细胞增殖活性(A490值)差异均无统计学意义(F值分别为2.85、1.34,均P > 0.05);孵育24 h时,各组间差异有统计学意义(F=10.41, P< 0.01)。MDC法检测显示,孵育4 h和12 h时,0、0.05、0.10、0.15、0.20和0.50 mmol/L α硫辛酸组间自噬体阳性细胞百分率差异均无统计学意义(F值分别为0.11、0.10,均P> 0.05);孵育24 h时,各组间差异有统计学意义(F=8.03,P< 0.05)。Western印迹法检测显示,孵育4 h和12 h时,0、0.05、0.10、0.15、0.20和0.50 mmol/L α硫辛酸组间细胞LC3-I向LC3-II转化(LC3-II /LC3-I)水平差异均无统计学意义(F值分别为3.38、2.13,均P> 0.05),但孵育24 h时各组间差异有统计学意义(F=37.49,P< 0.01)。
结论α硫辛酸可能抑制人皮肤成纤维细胞基础自噬。