ERIC—PCR指纹图谱及电镜技术在纳豆生产菌鉴定中的应用

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  摘要:纳豆是一种传统的日本食品,由纳豆菌在一定温度湿度条件下发酵大豆而来,新鲜纳豆表面金黄色,风味独特营养丰富。纳豆的主要发酵菌为纳豆菌,属芽孢杆菌属,称为纳豆枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis var. natto),是好氧的革兰氏阳性菌。利用扫描电子显微镜和ERIC-PCR指纹图谱技术对4株纳豆菌(高桥纳豆、MIZKAM 1、寿纳豆、MIZKAM无臭)进行了亲缘关系鉴定。结果显示,MIZKAM无臭与寿纳豆的亲缘关系较近,而高桥纳豆与其他品种亲缘关系较远。 全文查看链接   1.2.5ERIC-PCR扩增ERIC-PCR扩增应用的引物ERIC1(5′-ggggTACCTTgCgACTAACAAATATgCT-3′)、ERIC2(5′-TgCTCTAgACTCTATTCCCTACCATCATgTTC-3′)均由上海生工生物工程有限公司合成。ERIC-PCR反应体系为50 μL,由25 μL Dream Taq PCR Master Mix(2×)、2 μL引物ERIC1(20 μmol/L)、2 μL引物ERIC2(20 μmol/L)、3 μL 基因组DNA、18 μL去离子水组成。ERIC-PCR反应条件为95 ℃预变性5 min;94 ℃变性45 s,52 ℃退火1 min,65 ℃ 延伸5 min,35个循环;最后65 ℃延伸 16 min,4 ℃ 结束扩增。 全文查看链接
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