嗜肺军团菌主要免疫原基因真核表达质粒的构建与表达

来源 :四川大学学报：医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：funwoods

【摘要】

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目的构建嗜肺军团菌主要免疫原基因的真核表达重组质粒pcDNA3．1-ip，并观察其在真核细胞中的表达。方法以嗜肺军团菌1型DNA为模板，PCR扩增获得嗜肺军团菌咖基因，将其定向插入载体p

【作者】

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杨志伟陈建平刘明杰张雷刘德松

【机构】

：

四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室

【出处】

：

四川大学学报：医学版

【发表日期】

：

2007年2期

【关键词】

：

嗜肺军团菌主要免疫原基因转染体外表达 Legionella pneumophila Immunogenic protein gene Transfec

【基金项目】

：

国家自然科学基金（批准号303000302）和四川省学术技术带头人培养基金（4200316）资助

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目的构建嗜肺军团菌主要免疫原基因的真核表达重组质粒pcDNA3．1-ip，并观察其在真核细胞中的表达。方法以嗜肺军团菌1型DNA为模板，PCR扩增获得嗜肺军团菌咖基因，将其定向插入载体pcDNA3．1（＋），构建真核表达重组质粒pcDNA3．1-ip。经限制性核酸内切酶HindⅡ和BarnHⅠ酶切鉴定、PCR和核酸序列分析后，用脂质体法将重组质粒pcDNA3．1-ip转染NIH3T3细胞，采用免疫荧光法和Western blot分别鉴定pcDNA3．1-ip的瞬时和稳定表达。结果成功构建了嗜肺军团菌咖基因

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