四步法消除SYBR GreenⅠ实时定量RT-PCR中引物二聚体的影响

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：bingling1054

【摘要】

：

为建立一种新的SYBR greenⅠ实时定量RT-PCR方法，使之能够有效消除引物二聚体(PDs)对实时定量结果的影响，对RT-PCR特异性扩增产物和PDs分别进行了凝胶电泳检测和熔解曲线分析，依

【作者】

：

张驰宇张高红杨敏贲昆龙

【机构】

：

中国科学院昆明动物研究所分子与细胞免疫学实验室,中国科学院研究生院,中国科学院昆明动物研究所分子与细胞免疫学实验室

【出处】

：

中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

：

2004年3期

【关键词】

：

引物二聚体荧光实时定量RT-PCR SYBR greenⅠ 四步法 RNA定量

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目 (No .3 0 170 894)~~

下载到本地 , 更方便阅读

下载此文赞助VIP

声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架

论文部分内容阅读

为建立一种新的SYBR greenⅠ实时定量RT-PCR方法，使之能够有效消除引物二聚体(PDs)对实时定量结果的影响，对RT-PCR特异性扩增产物和PDs分别进行了凝胶电泳检测和熔解曲线分析，依据PDs和扩增产物的熔解温度(Tm)特点，在通用的三步法的延伸步骤之后，增加一个短暂的(5s)恒温和荧光检测步骤，使这个步骤的温度高于PDs的Tm，但低于扩增产物的Tm，简称该法为四步法，PDs的Tm通常高于72℃，但低于扩增产物的Tm，将四步法第四步的温度设置在高于PDs的Tm，但低于扩增产物的Tm时，四步法能

其他文献

浅析建安企业完工百分比法中的问题

ue＊M＃’＃dkB4＃＃8＃”专利申请号:00109“7公开号:1278062申请日:00.06.23公开日:00.12.27申请人地址:（100084川C京市海淀区清华园申请人:清华大学发明人:隋森芳文摘:本发明属于生物技

期刊

建安企业完工百分比法应用问题

自动售检票系统发展与规划

会议

智能支付标准化设计理念

男性戒烟与癌症发病关系的前瞻性队列研究

会议

戒烟癌症发病风险

超声诊断原发性甲状腺淋巴瘤的研究进展

原发性甲状腺淋巴瘤(PTLs)是指淋巴瘤仅累及甲状腺组织和颈部淋巴结而无相邻或远处脏器转移。PTLs发病率较低,且超声的特征性表现尚有待分析、总结,故在诊断时易漏诊、误诊。

期刊

甲状腺淋巴瘤超声检查ThyroidLymphomaUltrasonography

细菌溶解产物治疗反复下呼吸道感染患儿的疗效观察

目的探讨细菌溶解产物治疗反复下呼吸道感染患儿的临床疗效。方法将140例反复下呼吸道感染患儿随机分为2组各70例。对照组采用常规治疗,研究组在常规治疗基础上加用细菌溶解

期刊

下呼吸道感染细菌溶解产物免疫功能免疫球蛋白疗效lower respiratory tract infectionbacterial lysatesim

基于青年参与视角的两岸节事交流探讨

青年是两岸未来关系的构建者,两岸青年的有效交流意义深远。两岸节事交流活动为两岸青年交流交往建立友谊搭建了桥梁,但也存在资源配置错位、内涵挖掘有限、交往缺乏惯性等问

期刊

两岸青年节事活动青年交流

整合现有信息化网络资源强化12315申(投)诉、举报信息系统的功能

期刊

信息化网络消费纠纷受理条件保护知识产权举报投诉工商局申诉案件信息系统互联互通消费者

实施五结合改革促进农村卫生事业健康发展——山东省泰安市农村卫生改革情况调查

泰安市位于山东省中部,总面积1.27万平方公里,全市辖6个县市区,86个乡镇、办事处,3754个行政村,总人口543.1万人,其中农村人口377.9万人,占总人口的69.6%.2001年全市GDP448亿

期刊

农村卫生改革卫生院农村卫生工作乡镇卫生院院长乡村卫生一体化农村社区卫生服务村卫生所农村卫生事业初级卫生保健山东省泰安市

《瑞士民法典》及其对我国民法典制定的启示

产生于19世纪末20世纪初的《瑞士民法典》，无论是在其制定还是在其内容结构上，均具有不同于《法国民法典》和《德国民法典》之处，颇具个性和特色，可谓世界民法典大家族中的一颗耀

期刊

瑞士民法典制定内容结构特点启示

四步法消除SYBR GreenⅠ实时定量RT-PCR中引物二聚体的影响

其他学术论文