【摘 要】
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为给猪伪狂犬病病毒的诊断及防治提供科学依据,参考GenBank中猪伪狂犬病病毒(PRV)gE基因序列,设计1对特异性引物,以PRV GZ-Z1株DNA为模板,进行gE基因的PCR扩增,扩增产物与pMD
【机 构】
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贵州大学动物科学学院; 贵州省动物疫病研究室; 贵州大学教学实验场;
【基金项目】
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贵州省科学技术基金项目“猪伪狂犬病病毒贵州株的分离鉴定及gE基因的克隆研究”[黔科合J字(2007)2065];贵州省农业科技攻关项目“贵州省规模化猪场繁殖障碍性疫病的调查及综合防治模式的研究”[黔科合NY字(2010)3042]
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为给猪伪狂犬病病毒的诊断及防治提供科学依据,参考GenBank中猪伪狂犬病病毒(PRV)gE基因序列,设计1对特异性引物,以PRV GZ-Z1株DNA为模板,进行gE基因的PCR扩增,扩增产物与pMD18-T载体连接、鉴定正确后,再亚克隆至pET32a(+)原核表达载体中,经鉴定后测序。结果表明:目的片段为PRV gE基因完整开放阅读框,大小1 734bp,编码577个氨基酸,在pET32a(+)载体中位置正确,表明,pET32a-gE原核表达质粒构建成功。该基因与国内外其他18株PRV的gE基因推导氨基酸序列同源性为94.8%～98.6%;与国外分离株属同一个进化分支,遗传关系相对较近;而与国内Fa、Min、GDSH等毒株亲缘关系较远。
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