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重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅰ用pET31b载体的表达和纯化

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：chengczl

【摘 要】

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化学全合成虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ(HWTX-Ⅰ)基因在大肠杆菌中被表达, 采用pET31b载体,表达产物N端为大肠杆菌酮基立体异构酶的融合蛋白,经亲和连续6个组氨酸的亲和柱层析后,溴化

【作 者】

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刁建波 刘君梁 梁宋平 

【机 构】

：

北京大学,湖南师范大学

【出 处】

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中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

：

2003年2期

【关键词】

：

虎纹捕鸟蛛毒素Ⅰ 基因工程 基因克隆 基因表达 融合蛋白 纯化 pET31b载体 生物学活性 HWTX-Ⅰ  pET31b  CNBr  expression 

【基金项目】

：

国家自然科学基金

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论文部分内容阅读

化学全合成虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ(HWTX-Ⅰ)基因在大肠杆菌中被表达, 采用pET31b载体,表达产物N端为大肠杆菌酮基立体异构酶的融合蛋白,经亲和连续6个组氨酸的亲和柱层析后,溴化氰切割融合蛋白,再经高效液相色谱反相柱纯化,得到了重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅰ.质谱分析及N端测序表明,rHWTX-Ⅰ系正确表达产物. 还原复性的rHWTX-Ⅰ表现出与天然HWTX-Ⅰ一致的生物学活性.

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