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目的
观察创伤性颅脑损伤(TBI)后脑室下区(SVZ)Notch1蛋白表达的动态变化,探讨其与Notch信号通路开放及TBI后神经干细胞(NSCs)增殖的相关性。
方法96只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(仅切开头皮和颅骨开窗,n=16)、对照组(不做任何处理,n=16)和实验组(采用Feeney’s自由落体模型建立中型TBI模型,n=64),其中实验组大鼠依据取材时间不同分为1、3、7、14 d亚组,每亚组16只。采用免疫荧光化学染色检测各组大鼠SVZ区脑组织Notch1/巢蛋白(nestin)双标染色阳性细胞表达,采用Western blotting检测Notch1蛋白表达。
结果免疫荧光化学染色结果显示,实验组SVZ区脑组织Notch1/nestin双标染色阳性细胞数量在TBI后1 d时即升高出现峰值,达对照组的2~3倍,其后逐渐下降,14 d时基本恢复正常,4个亚组间差异有统计学意义(P<0.05);实验组1、3、7 d亚组Notch1/nestin双标染色阳性细胞数量分别与对照组、假手术组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blotting结果显示,对照组及假手术组Notch1蛋白表达量无明显差别,实验组TBI后1 d时SVZ区Notch1蛋白表达量相对较多,后逐渐下降,14 d时降至正常水平。
结论大鼠TBI后可激活Notch1蛋白表达,使Notch信号通路开放,从而影响NSCs增殖的调控。