【摘 要】
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目的 探讨α7神经型尼古丁受体(nAChR)表达改变与淀粉样蛋白前体蛋白(APP)代谢、细胞存活率及脂质过氧化水平的关系,以了解α7 nAChR的神经保护作用,以及该受体水平与阿尔茨
【机 构】
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贵阳医学院病理学教研室及分子生物学重点实验室
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目的 探讨α7神经型尼古丁受体(nAChR)表达改变与淀粉样蛋白前体蛋白(APP)代谢、细胞存活率及脂质过氧化水平的关系,以了解α7 nAChR的神经保护作用,以及该受体水平与阿尔茨海默病发病的关系.方法 设计并合成α7 nAChR基因特异性小分子干扰RNA(siRNA),转染SH-SY5Y细胞;用20μmoL/L DMXB处理细胞;培养48 h后收集细胞,分别应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测转染细胞及DMXB处理后的细胞αnAChR mRNA及蛋白表达水平的变化;并用1μmol/L β-淀粉样肽25-35(Aβ25-35)处理细胞,测定分泌型APP、总APP蛋白表达的变化;比色法测定脂质过氧化产物含量;MTT方法测定细胞活力.结果 转染siRNA后,与对照组相比,α7 nAChR mRNA及蛋白表达量降低(抑制率分别为80%和69%)、脂质过氧化产物丙二醛含量明显增加、分泌型APP表达下降、细胞活力明显低于对照组,且能增强Aβ的细胞毒性作用;用DMXB处理细胞后能使α7nAChR的表达增加23%、增加分泌型APP的表达、并能对抗A13引起的细胞活力下降及脂质过氧化水平的增强.结论 α7nAChR可能通过增强α-分泌酶对APP的切割、增强细胞抗氧化能力及对抗AB的神经毒性作用来发挥神经保护作用,其表达减少与阿尔茨海默病的发病机制有密切的关系.
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