人源甲状腺髓样癌噬菌体抗体库的构建及初步鉴定

来源 :重庆医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wlc198812
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目的:应用噬菌体抗体展示技术,构建大容量天然人源甲状腺髓样癌(medullarythyroidcarcinoma,MTC)噬菌体单链抗体库。方法:提取MTC病人癌周淋巴结总RNA.通过RT—PCR方法获得抗体可变区基因vH和VL基因片断,以它们为模板分别扩增V-Linker和VLinker,再用剪切重叠延伸PCR技术将之拼接组装成单链抗体可变区基因片段(singlechainfragmentvariable,scFv)后引入酶切位点蹄I和NotL将scFv基因克隆入噬菌粒载体pCANTAB-5E后经电转入
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