【摘 要】
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为建立一种能够快速检测新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)的方法,本研究参考GenBank上登录的NDRV S3基因保守序列设计特异性引物。经条件优化后,建立了检测NDRV的RT-PCR方法。对其特异
【机 构】
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遂溪县遂城畜牧兽医站,大沥镇农林服务中心,佛山科学技术学院生命科学学院
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为建立一种能够快速检测新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)的方法,本研究参考GenBank上登录的NDRV S3基因保守序列设计特异性引物。经条件优化后,建立了检测NDRV的RT-PCR方法。对其特异性、敏感性和重复性进行检验。结果显示:该方法仅能从NDRV分离毒中扩增到与预期大小相符,长度为298 bp的特异性目的片段,检测灵敏度达到83.4 pg病毒RNA;而其它病毒:番鸭呼肠孤病毒、禽呼肠孤病毒、鸭病毒性肝炎病毒、鸭瘟病毒、鸭新城疫病毒和禽流感病毒等样品的扩增结果均为阴性。采用该方法对在广东不同地区采集的15份鸭病料样品进行检测,NDRV阳性率为53.33%。表明建立的RT-PCR方法特异性强、敏感度高,可用于NDRV的临床诊断和流行病学调查。
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