【摘 要】
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目的探索总结一种简单、高效的大鼠海马神经干细胞原代培养方法。方法选取新生24 h的SD大鼠,剥离出双侧海马,用机械吹打法制成细胞悬液,加入培养液,接种于培养皿中,3 d后半量
【机 构】
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北京中医药大学第三附属医院,首都医科大学中心实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(No.81673930)
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目的探索总结一种简单、高效的大鼠海马神经干细胞原代培养方法。方法选取新生24 h的SD大鼠,剥离出双侧海马,用机械吹打法制成细胞悬液,加入培养液,接种于培养皿中,3 d后半量换液,5~7 d后可传代。每天在荧光倒置显微镜下观察细胞的生长状况,采用免疫荧光法对第2代神经干细胞进行鉴定。结果本方法能准确分离出海马组织,培养出的神经干细胞中无其他混杂的细胞生长,经鉴定呈兔抗巢蛋白(Nestin)阳性和5-嗅-2-脱氧尿苷(BrdU)阳性。结论运用本方法获得的海马神经干细胞纯度高、细胞活力高、增殖能力强。
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