小干扰RNA技术下调视网膜母细胞瘤细胞株SO-Rb50中Survivin基因表达的研究

被引量 : 0次 | 上传用户:allanvte001
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读

目的 应用RNA干扰(RNAi)技术沉默视网膜母细胞瘤细胞株SO-Rb50中凋亡抑制因子Survivin的表达,观察其干扰效果及对细胞的影响.方法 实验研究.体外化学法合成针对人Survivin基因的特异性小干扰RNA(siRNA)和对Survivin基因无沉默效果的阴性对照siRNA,利用转染试剂分别将siRNA转入SO-Rb50细胞株,通过半定量RT-PCR和Western blot检测其对SO-Rb50细胞中Survivin基因和蛋白表达的抑制作用,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度siRNA对细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测转染后细胞凋亡率和细胞周期改变,荧光显微镜下观察细胞凋亡形态.对多组间数据比较采用单因素方差分析,处理组与对照组比较采用Dunnett-t检验.结果 Survivin特异性siRNA转染细胞24 h后Survivin mRNA和蛋白表达水平明显下调,对照组中其表达则无明显改变.MTT法结果显示Survivin特异性siRNA浓度为35、70、100 nmol/L时均对SO-Rb50细胞增殖具有抑制作用(P<0.05),且具有剂茸依赖性.流式细胞仪检测发现Survivin特异性siRNA组出现凋亡亚二倍体峰,细胞被阻滞于G0/G1期,较对照组增加了8.11%,G2/M期细胞比例减少了5.75%,S期细胞仅减少了2.26%.荧光显微镜下可见部分细胞出现染色质浓缩和凋亡小体等典型的凋亡形态学变化.结论 针对Survivin的RNA干扰技术可有效地下调SO-Rb50细胞中Survivin基因表达,进而抑制SO-Rb50细胞增殖和诱导其凋亡,为视网膜母细胞瘤的基因治疗提供了重要的途径。

其他文献
城市报建工作是一个阳光工程,在信息技术发展的今天,实现城市报建工作的网络化管理,通过建立城市报建工作流的petri网,设计相应的计算机算法来实现计算机程序化管理。文中重点设计了报建审批工作流的Petri网,依据工作流的Petri网,应用C++语言设计报建工作主控模块的算法。
根据有源滤波器中畸变电流检测的特点,提出了一种基于傅里叶级数分解的递推傅里叶级数算法的畸变电流检测方法.采用双CPU来构成整个检测系统,利用双CPU的并行工作来提高检测
2015年7月,以岭医院肌萎缩一科病房里来了一个小患者.他只有5个月大,躺在妈妈的怀抱中,纯真无瑕的小脸上露出率真可爱的笑容,大家都觉得他就是一个“小可爱”.rn可是这个可爱
期刊
中华临床实验室管理电子杂志于2013年创刊,是由国家卫生和计划生育委员会主管,中华医学会主办,中华医学电子音像出版社出版的中华医学会电子版系列杂志之一。本刊为季刊(CN11-934
期刊
采用模拟电荷法对高压SF6断路器断口附近复杂三维场域进行了电场计算,得到了不同截面等电位线的分布情况及电场分布图.计算结果表明,在整个场域中,屏蔽罩和并联电容器组起到
重症肌无力是一种对身体危害严重的疾病,我们不妨通过以下问题来深入了解一下这一疾病.rn1.有哪些因素可能引起重症肌无力,是否可以预防?如果可以预防,应采取怎样的措施避免
期刊
来自湖南的小娟1岁半开始就右眼皮下垂,勉强抬起又很快垂下,尽力抬起后则会不停地眨眼,在当地眼科治疗了一年多没有效果,辗转多地就诊最终在5岁时被诊断为重症肌无力.当得知