【摘 要】
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目的 探讨染料木黄酮对缺氧复氧心肌细胞损伤的影响与其机制.方法 将心肌细胞H9 c2分成对照组、模型组(缺氧复氧)、染料木黄酮组(缺氧复氧,2 mol·L-1染料木黄酮预处理)、染料木黄酮+anti-miR-NC组(缺氧复氧,转染inhibitor control,2 mol·L-1染料木黄酮预处理)、染料木黄酮+anti-miR-499-5 p组(缺氧复氧,转染miR-499-5 p inhibitor,2 mol·L-1染料木黄酮预处理).用Real-time聚合酶链反应(PCR)法检测miR-499
【机 构】
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浙江大学 医学院 附属第二医院 心血管内科,浙江 杭州310000
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目的 探讨染料木黄酮对缺氧复氧心肌细胞损伤的影响与其机制.方法 将心肌细胞H9 c2分成对照组、模型组(缺氧复氧)、染料木黄酮组(缺氧复氧,2 mol·L-1染料木黄酮预处理)、染料木黄酮+anti-miR-NC组(缺氧复氧,转染inhibitor control,2 mol·L-1染料木黄酮预处理)、染料木黄酮+anti-miR-499-5 p组(缺氧复氧,转染miR-499-5 p inhibitor,2 mol·L-1染料木黄酮预处理).用Real-time聚合酶链反应(PCR)法检测miR-499-5 p表达,用细胞计数法-8(CCK-8)实验测定细胞增殖活力,用膜联蛋白V-FITC(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)双染法检测细胞凋亡,用蛋白质印迹法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C蛋白表达,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量,用紫外分光光度法检测过氧化氢酶(CAT)含量,用黄嘌呤氧化法检测超氧化物歧化酶(SOD)含量,用JC-1法检测线粒体膜电位.结果 对照组、模型组、染料木黄酮组、染料木黄酮+anti-miR-NC组、染料木黄酮+anti-miR-499-5p组心肌细胞中miR-499-5p表达量分别为1.00±0.00,0.40±0.04,0.74±0.09,0.73±0.08,0.40±0.03,细胞增殖活力(OD值)分别为0.63±0.05,0.35±0.03,0.54±0.04,0.54±0.03,0.42±0.02,细胞凋亡率分别为(5.17±0.75)％,(23.77±4.36)％,(10.65±1.33)％,(10.53±1.06)％,(14.71±1.78)％,MDA含量分别为(1.25±0.13),(5.39±0.41),(2.10±0.35),(2.02±0.29),(3.79±0.31)nmol·mg-1,CAT含量为(43.38±5.58),(26.82±1.92),(46.67±5.42),(43.85±4.67),(29.95±2.26)U·mg-1,线粒体膜电位为1.00±0.00,0.54±0.05,0.89±0.08,0.92±0.09,0.67±0.07.以上指标,对照组、染料木黄酮组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);染料木黄酮+anti-miR-499-5 p组与染料木黄酮+anti-miR-NC组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 染料木黄酮通过上调miR-499-5 p减轻缺氧复氧心肌细胞损伤.
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