目的:明确疏肝补肾毓麟汤抑制电压依赖性阴离子通道2（VDAC2）基因甲基化,通过环磷酸腺苷/蛋白激酶A（cAMP/PKA）通路,调节线粒体功能,提高精子活力的作用机制。方法:雄性SD大鼠40只随机分成空白组、模型组、疏肝补肾毓麟汤高、低剂量组及左卡尼汀组,每组8只。采用腺嘌呤(0.05 g·kg-1)灌胃14 d,复制少弱精症大鼠模型;疏肝补肾毓麟汤组给予疏肝补肾毓麟汤高、低剂量(32.4,8.1 g·kg-1)灌胃;左卡尼汀组予以左卡尼汀(0.27 g·kg-1)灌胃。全自动精子分析仪检测精子活力;苏木素-伊红（HE）染色观察睾丸组织病理形态学变化;流式细胞法检测精子线粒体膜电位差;免疫荧光法检测睾丸VDAC2的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测睾丸组织VDAC2 mRNA表达;亚硫酸氢盐测序法检测睾丸组织VDAC2基因甲基化;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测睾丸组织cAMP表达;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测睾丸组织PKA蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组精子密度及活动率均显著降低（P<0.01）,线粒体膜电位显著增高（P<0.01）,睾丸组织VDAC2的mRNA及蛋白,PKA蛋白,cAMP含量均显著降低（P<0.01）,VDAC2甲基化程度显著增高（P<0.01）;与模型组比较,左卡尼汀组、疏肝补肾毓麟汤高、低剂量组精子密度及活动率、线粒体膜电位均显著升高（P<0.01）,睾丸组织VDAC2的mRNA及蛋白,PKA蛋白,cAMP含量均显著升高（P<0.01）,VDAC2甲基化程度显著降低（P<0.01）;与左卡尼汀组比较,疏肝补肾毓麟汤低剂量组精子密度及活动率、线粒体膜电位均显著降低（P<0.01）,睾丸组织VDAC2的mRNA及蛋白,PKA蛋白,cAMP含量表达均显著降低（P<0.01）,VDAC2甲基化程度显著升高（P<0.01）。结论:疏肝补肾毓麟汤可能通过抑制VDAC2基因甲基化,增加VDAC2表达,调节cAMP/PKA通路,改变线粒体膜电位增强精子活力。