重组抗血小板多肽在Cos-7细胞中的表达、纯化和活性检测

来源 :中国现代医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fugaowen
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目的克隆并在Cos-7细胞中表达有活性的抗血小板多肽。方法合成编码抗血小板多肽赖氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸(KGD)的核苷酸序列并克隆于pCDNA3.1/myc-hisB载体,构建重组表达载体pcD-NA3.1-KGD。以lipofectamine 2000将重组表达载体转染Cos-7细胞,G418筛选抗性细胞克隆。裂解细胞并抽提胞内蛋白,采用融合表达的myc多肽表位抗体,通过Western blot检测目的蛋白的表达。大量扩增高表达KGD融合蛋白的抗性细胞克隆,ProBondTM系统纯化KGD融合蛋白。应
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