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应用高效液相色谱法,优化了牛奶中3种四环素的检测方法且力求操作简单、快捷。本方法采用0.1 mol/LEDTA-McIlvaine缓冲液(pH 4.0)提取奶中的残留的三种四环素类抗生素,通过C18固相萃取柱进行提纯、净化,提高了方法的灵敏度。结果表明,该方法最低检出限达到国标的兽药残留最低限量要求,加标回收率103%~109%之间。