具有杀线活性马尾松内生细菌的筛选与鉴定

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为探究马尾松内生细菌的多样性,寻找具有杀松材线虫活性的内生细菌。以前期从南京中山陵健康马尾松上分离的58株内生细菌为研究对象,利用浸渍法对内生细菌发酵滤液的杀线活性进行测定,采用形态学观察、生理生化特征测定、16S rDNA序列以及系统发育树等方法对筛选出的具有杀线活性的内生细菌进行种类鉴定。从中筛选出一株具有明显杀线功能的内生细菌NZM13-11。内生细菌NZM13-11发酵滤液在与松材线虫混合培养12 h后,校正死亡率达到92.2%,36 h后,校正死亡率达到100%。在12 h时,松材线虫的虫体被消解,消解率达85%,在培养48 h后,消解率达到100%,在显微镜视野下已经没有完整的虫体。对发酵滤液进行不同倍数稀释后,在8倍稀释倍数处理36 h,死亡率依然高达72.9%。通过对NZM13-11进行形态学观察、生理生化特征测定、16S rDNA序列以及系统发育树分析,将菌株NZM13-11鉴定为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。研究表明,在松树体内筛选出一株内生细菌NZM13-11能够高效地杀死松材线虫,该菌株被鉴定为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。该研究结果可以进一步深入,以探究利用马尾松内生细菌资源来防控松材线虫病的可能性。
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